這是一份詳細(xì)、結(jié)構(gòu)化且面向用戶操作的 伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)與使用說明手冊(cè)。

一、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)概述

Gene Pulser Xcell 是一款全功能、模塊化的實(shí)驗(yàn)室電穿孔儀，適用于細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞及其他真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)化/轉(zhuǎn)染。其核心特點(diǎn)是 指數(shù)衰減波 電擊，通過精確控制電壓、電容和電阻參數(shù)，在細(xì)胞膜上形成可逆的瞬時(shí)孔隙，使外源DNA、RNA或其他分子高效進(jìn)入細(xì)胞。

二、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)組件

1、主機(jī): 包含控制界面、電容模塊和高壓電源。

2、電擊槽: 可容納1-4mm間隙的電擊杯。

3、專用電擊杯: 一次性或可重復(fù)使用（需清潔消毒），規(guī)格通常為1mm（哺乳動(dòng)物細(xì)胞）、2mm（通用）、4mm（細(xì)菌）。

4、PC連接軟件（可選）: 用于遠(yuǎn)程控制和數(shù)據(jù)管理。

三、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)核心技術(shù)參數(shù)

類型：電轉(zhuǎn)化儀

尺寸（長(zhǎng)x寬x高）：31x30x14 cm

重量：6.6 kg

電源：240W（在短時(shí)間充電時(shí)）

輸出：電壓： 10–3,000 V

電容：10–500 V，25–3,275 µF，增量為 25 µF

樣品電阻：低 20 ?（10–2,500 V 時(shí)）低 600 ?（2,500–3,000 V 時(shí)）

測(cè)量范圍：從原代細(xì)胞和干細(xì)胞到細(xì)菌和酵

電阻（并聯(lián)）：50–1,000 ?，增量為 50?，正無窮大

連續(xù)工作時(shí)間：8小時(shí)

環(huán)境溫度：溫度 0–35℃，濕度 0–95%

產(chǎn)地：新加坡

四、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作流程

A、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1、儀器準(zhǔn)備: 連接電源，打開主機(jī)電源開關(guān)。儀器進(jìn)行自檢。

2、參數(shù)預(yù)設(shè): 根據(jù)待轉(zhuǎn)染細(xì)胞類型，參考附錄的推薦起始參數(shù)或已發(fā)表的文獻(xiàn)，在主機(jī)面板上設(shè)置預(yù)期的 電壓 (V)、電容 (C) 和電阻 (R)。

3、樣品與電擊杯準(zhǔn)備:

將待轉(zhuǎn)染細(xì)胞與DNA/分子混合于適當(dāng)?shù)木彌_液中（如PBS、電轉(zhuǎn)專用緩沖液）。保持樣品和電擊杯低溫（冰上） 以增加細(xì)胞存活率。

將混合液轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)間隙的電擊杯（例如，哺乳動(dòng)物細(xì)胞常用1mm杯），確保液體覆蓋電極底部，且無氣泡。

擦干電擊杯外壁，將其穩(wěn)妥放入電擊槽。

B、電擊過程

1、安全警告: 確保電擊槽蓋緊閉（安全聯(lián)鎖裝置），儀器顯示“READY"。

2、執(zhí)行電擊: 同時(shí)按下電擊槽兩側(cè)的 “Pulse" 按鈕（雙手操作安全設(shè)計(jì)），直至聽到蜂鳴聲并看到電擊完成提示。

3、記錄結(jié)果: 屏幕將顯示 實(shí)際輸出電壓 和關(guān)鍵的 時(shí)間常數(shù) (τ)。記錄這些數(shù)據(jù)對(duì)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。

C、電擊后處理

1、立即取出電擊杯，向杯中加入適量的恢復(fù)培養(yǎng)基或緩沖液，溫和吹打混勻后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器中。

2、根據(jù)細(xì)胞類型，進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)（如，在37°C， 5% CO?培養(yǎng)箱中恢復(fù)培養(yǎng)）。

五、全注意事項(xiàng)

1、高壓危險(xiǎn)！ 儀器內(nèi)部和電擊杯中存在致命高壓。切勿在儀器通電或電擊后立即打開電擊槽蓋或觸摸電擊杯內(nèi)部電極。等待至少10秒，或確認(rèn)屏幕無高壓提示。

2、生物危害: 電擊杯和樣品可能含有生物危害物質(zhì)。處理時(shí)需佩戴手套，并按生物安全規(guī)程處置廢棄物。

3、電弧預(yù)防: 確保電擊杯外壁干燥，電極清潔無腐蝕，樣品量足夠且無氣泡，以防止產(chǎn)生電弧損壞儀器和樣品。

4、專用電擊杯: 僅使用伯樂原廠或認(rèn)證兼容的電擊杯，不兼容的杯子可能導(dǎo)致參數(shù)不準(zhǔn)或產(chǎn)生電弧。